Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatadiki, guruch ildizlaridan ajratib olingan rizosfera simbiotik qo'ziqorini *Kosakonia oryziphila* NP19 *Pyricularia oryzae* keltirib chiqaradigan guruch portlashini nazorat qilish uchun istiqbolli o'simliklarning o'sishini rag'batlantiruvchi biopestitsid va biopestitsid hisoblanadi. In vitro tajribalar Khao Dawk Mali 105 (KDML105) navining yasemin guruch ko'chatlarining yangi barglarida o'tkazildi. Natijalar shuni ko'rsatdiki, NP19 *Pyricularia oryzae* conidia ning unib chiqishini samarali ravishda inhibe qildi. *Pyricularia oryzae* infeksiyasi uch xil davolash sharoitida inhibe qilindi: birinchidan, guruch NP19 bilan kolonizatsiya qilindi va *Pyricularia oryzae* conidia bilan emlandi; ikkinchidan, barglarga NP19 va *Pyricularia oryzae* conidia aralashmasi qo'llanildi;
Rizosfera bakteriyasi *Kosakonia oryziphila* NP1914guruch ildizlaridan ajratib olingan (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 o'simliklarning o'sishini rag'batlantiruvchi xususiyatlarga ega, jumladan, azotni fiksatsiya qilish, indoleatsetik kislota (IAA) ishlab chiqarish va fosfatning erishi. Qizig'i shundaki, *Kosakonia oryziphila* NP19 xitinaza ishlab chiqaradi.14.*Kosakonia oryziphila* NP19 ni KDML105 guruch urug'lariga qo'llash guruch portlashi infektsiyasidan keyin guruchning omon qolishini yaxshiladi. Ushbu tadqiqotning maqsadi (i) *Kosakonia oryziphila* NP19 ning guruch portlashiga qarshi inhibitiv mexanizmini aniqlash va (ii) *Kosakonia oryziphila* NP19 ning guruch portlashini nazorat qilishdagi ta'sirini o'rganishdir.
Oziq moddalar o'simliklarning o'sishi va rivojlanishida hal qiluvchi rol o'ynaydi, turli mikrobial kasalliklarni nazorat qiluvchi omillar bo'lib xizmat qiladi. O'simlikning mineral ozuqasi uning kasalliklarga chidamliligini, morfologik yoki to'qima xususiyatlarini va virulentligini yoki patogenlarga qarshi omon qolish qobiliyatini belgilaydi. Fosfor fenol birikmalarining sintezini oshirish orqali rivojlanishni sekinlashtirishi va guruch shishishi og'irligini kamaytirishi mumkin. Kaliy odatda guruch shishishi, bakterial barg dog'i, barg qobig'i dog'i, poya chirishi va barg dog'i kabi ko'plab guruch kasalliklarining paydo bo'lishini kamaytiradi. Perrenud tomonidan olib borilgan tadqiqot shuni ko'rsatdiki, yuqori kaliyli o'g'itlar guruchning zamburug'li kasalliklarining paydo bo'lishini kamaytirishi va hosildorlikni oshirishi mumkin. Ko'plab tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, oltingugurtli o'g'itlar ekinlarning zamburug'li patogenlarga chidamliligini oshirishi mumkin.27Haddan tashqari magniy (xlorofillning tarkibiy qismi) guruchning portlashiga olib kelishi mumkin.21Sink patogenlarni to'g'ridan-to'g'ri o'ldirishi mumkin, shu bilan kasallikning og'irligini kamaytiradi.22Dala sinovlari shuni ko'rsatdiki, dala tuprog'idagi fosfor, kaliy, oltingugurt va rux konsentratsiyasi qozondagi tajribaga qaraganda yuqori bo'lsa-da, guruch purkagichi hali ham guruch barglari orqali tarqaladi. Tuproqdagi ozuqa moddalari guruch purkagichini nazorat qilishda unchalik samarali bo'lmasligi mumkin, chunki nisbiy namlik va harorat kuchli patogenlar yuqishi uchun noqulaydir.
Dala sinovlarida barcha davolash usullarida Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis va C. gleum aniqlandi. Stenotrophomonas maltophilia bug'doy, suli, bodring, makkajo'xori va kartoshka rizosferasidan ajratib olingan va biokontrol ko'rsatgan.faoliyatColletotrichum nymphaeae ga qarshi.28 Bundan tashqari, P. dispersa qora tanlilarga qarshi samarali ekanligi haqida xabar berilgan.chirishshirin kartoshka.29 Bundan tashqari, Xanthomonas sacchari ning R1 shtammi Burkholderia keltirib chiqaradigan guruch portlashi va panikula chirishiga qarshi antagonistik faollikni ko'rsatdi.glumae.30Burkholderia oryzae NP19 guruch to'qimasi bilan unib chiqish jarayonida simbiotik aloqa o'rnatishi va ba'zi guruch navlari uchun endemik simbiotik qo'ziqoringa aylanishi mumkin. Boshqa tuproq bakteriyalari ko'chirib o'tkazgandan keyin guruchni kolonizatsiya qilishi mumkin bo'lsa-da, kolonizatsiya qilinganidan keyin NP19 portlovchi qo'ziqorini guruchning bu kasallikka qarshi himoya mexanizmida bir nechta omillarga ta'sir qiladi. NP19 nafaqat P. oryzae o'sishini 50% dan ortiqqa bostiradi (onlayn ilovadagi S1 qo'shimcha jadvaliga qarang), balki barglardagi portlovchi o'smalar sonini kamaytiradi va dala sinovlarida NP19 (RBf, RFf-B va RBFf-B) bilan emlangan yoki kolonizatsiya qilingan guruch hosildorligini oshiradi (S3-rasm).
O'simlik portlashiga sabab bo'ladigan Pyricularia oryzae qo'ziqorini gemittrofik qo'ziqorin bo'lib, infeksiya paytida xo'jayin o'simlikdan ozuqa moddalarini talab qiladi. O'simliklar qo'ziqorin infektsiyasini bostirish uchun reaktiv kislorod turlarini (ROS) ishlab chiqaradi; ammo, Pyricularia oryzae xo'jayin tomonidan ishlab chiqarilgan ROSga qarshi kurashish uchun turli xil strategiyalardan foydalanadi.31Peroksidazalar patogenlarga qarshilik ko'rsatishda, jumladan, hujayra devori oqsillarining o'zaro bog'lanishida, ksilema devorlarining qalinlashishida, ROS ishlab chiqarilishida va vodorod peroksidni neytrallashtirishda rol o'ynaydi.32Antioksidant fermentlar o'ziga xos ROSni yig'ish tizimi bo'lib xizmat qilishi mumkin. Superoksid dismutaza (SOD) va peroksidaza (POD) o'zlarining antioksidant xususiyatlari orqali himoya reaksiyalarini boshlashga yordam beradi, SOD esa birinchi himoya chizig'i bo'lib xizmat qiladi.33Guruchda o'simlik peroksidaza faolligi *Pyricularia oryzae* va *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae* kabi o'simlik patogenlari bilan kasallanganidan keyin induktsiyalanadi.32Ushbu tadqiqotda, *Magnaporthe oryzae* NP19 bilan kolonizatsiya qilingan va/yoki emlangan guruchda peroksidaza faolligi oshdi; ammo, *Magnaporthe oryzae* peroksidaza faolligiga ta'sir qilmadi. Superoksid dismutaza (SOD), H₂O₂ sintaza sifatida, O₂⁻ ning H₂O₂ ga qaytishini katalizlaydi. SOD o'simlik ichidagi H₂O₂ konsentratsiyasini muvozanatlash orqali o'simliklarning turli stresslarga chidamliligida muhim rol o'ynaydi va shu bilan o'simliklarning turli stresslarga chidamliligini oshiradi³⁴. Ushbu tadqiqotda, idishdagi tajribada, *Magnaporthe oryzae* emlanganidan 30 kun o'tgach (30 DAT), RF va RBF guruhlaridagi SOD faolligi R guruhidagilarga nisbatan mos ravishda 121,9% va 104,5% yuqori bo'ldi, bu esa *Magnaporthe oryzae* infektsiyasiga SOD javobini ko'rsatadi. Ham qozonda, ham dala tajribalarida, *Magnaporthe oryzae* NP19 bilan ekilgan guruchdagi SOD faolligi ekilganidan 30 kun o'tgach, ekilmagan guruchdagiga nisbatan mos ravishda 67,7% va 28,8% yuqori bo'ldi. O'simliklarning biokimyoviy reaksiyalariga atrof-muhit, stress manbai va o'simlik turi³⁵ ta'sir qiladi. O'simliklarning antioksidant ferment faolligiga bevosita atrof-muhit omillari ta'sir qiladi, bu esa o'z navbatida o'simliklarning mikrobial hamjamiyatini o'zgartirish orqali o'simliklarning antioksidant ferment faolligiga ta'sir qiladi.
Ushbu tadqiqotda ishlatilgan guruch portlash kasalligi qo'ziqorini (Kosakonia oryziphila NP19, NCBI kirish raqami PP861312) shtammi edi13Tailandning Nakhon Phanom provinsiyasida (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E) RD6 guruch navining ildizlaridan ajratib olingan. Bu shtamm ozuqaviy bulonda (NB) 30°C va 150 rpm da 18 soat davomida yetishtirildi. Bakterial konsentratsiyani hisoblash uchun bakterial suspenziyaning 600 nm da yutilishi o'lchandi. Bakterial suspenziyaning konsentratsiyasi quyidagicha sozlandi:10⁶CFU/ml steril deionizatsiyalangan suv bilan (dH₂O). Guruch portlash qo'ziqorini (Pyricularia oryzae) kartoshka dekstroza agariga (PDA) dog'li ravishda emlandi va 25°C da 7 kun davomida inkubatsiya qilindi. Qo'ziqorin mitseliysi guruch kepagi agar muhitiga (2% (w/v) guruch kepagi, 0,5% (w/v) saxaroza va 2% (w/v) agar deionizatsiyalangan suvda eritildi, pH 7) o'tkazildi va 25°C da 7 kun davomida inkubatsiya qilindi. Konidiyalarni qo'zg'atish uchun miselyumga sezgir guruch navining sterilizatsiya qilingan bargi (KDML105) qo'yildi va 25°C da 5 kun davomida ultrabinafsha va oq yorug'lik ostida inkubatsiya qilindi. Konidiyalar miselyum va zararlangan barg yuzasini 10 ml sterilizatsiya qilingan 0,025% (v/v) Tween 20 eritmasi bilan muloyimlik bilan artib to'plandi. Qo'ziqorin eritmasi miselyum, agar va guruch barglarini olib tashlash uchun sakkiz qatlam doka orqali filtrlandi. Suspenziyadagi konidiyalar konsentratsiyasi keyingi tahlil uchun 5 × 10⁵ konidiya/ml ga o'rnatildi.
Kosakonia oryziphila NP19 hujayralarining yangi kulturalari NB muhitida 37 °C da 24 soat davomida kulturalash orqali tayyorlandi. Santrifüjdan so'ng (3047 × g, 10 daqiqa), hujayra granulasi yig'ildi, ikki marta 10 mM fosfat-buferlangan tuzli eritma (PBS, pH 7.2) bilan yuvildi va xuddi shu buferda qayta suspenziya qilindi. Hujayra suspenziyasining optik zichligi 600 nm da o'lchandi, taxminan 1.0 qiymatiga erishildi (ozuqaviy agar plastinkalariga qo'yish orqali aniqlangan 1.0 × 10⁷ CFU/μl ga teng). P. oryzae konidiyalari ularni PBS eritmasida suspenziyalash va gemotsitometr yordamida sanash orqali olindi. *K. oryziphila* NP19 va *P suspenziyalari. Barg surtish tajribalari uchun K. oryziphila* conidia mos ravishda 1,0 × 10⁷ CFU/μL va 5,0 × 10² conidia/μL konsentratsiyalarida yangi guruch barglarida tayyorlandi. Guruch namunalarini tayyorlash usuli quyidagicha edi: guruch ko'chatlaridan 5 sm uzunlikdagi barglar kesib olindi va namlangan changni yutish qog'ozi bilan qoplangan Petri idishlariga joylashtirildi. Beshta ishlov berish guruhi tashkil etildi: (i) R: nazorat sifatida bakterial emlashsiz guruch barglari, 0,025% (v/v) Tween 20 eritmasi bilan to'ldirilgan; (ii) RB + F: K. oryziphila NP19 bilan emlangan guruch, guruch portlashini keltirib chiqaradigan zamburug'ning 2 μL konidiya suspenziyasi bilan to'ldirilgan; (iii) R + BF: R guruhidagi guruch, 4 μl portlash zamburug'i konidiya suspenziyasi va K. oryziphila NP19 aralashmasi bilan to'ldirilgan (hajm nisbati 1:1); (iv) R + F: R guruhidagi guruchga 2 μl portlovchi qo'ziqorin konidiyalari suspenziyasi qo'shildi; (v) RF + B: R guruhidagi guruchga 2 μl portlovchi qo'ziqorin konidiyalari suspenziyasi qo'shildi va 30 soat davomida inkubatsiya qilindi, so'ngra bir joyda 2 μl K. oryziphila NP19 qo'shildi. Barcha Petri idishlari 25°C da qorong'uda 30 soat davomida inkubatsiya qilindi va keyin uzluksiz yorug'lik ostida joylashtirildi. Har bir guruh uch nusxada shakllantirildi. 72 soatlik madaniyatdan so'ng, o'simlik to'qimalari kuzatildi va skanerlovchi elektron mikroskopiya (SEM) yordamida tahlil qilindi. Qisqacha aytganda, o'simlik to'qimalari 2,5% (v/v) glutaraldegid o'z ichiga olgan fosfat buferiga fiksatsiya qilindi va bir qator etanol eritmalari orqali suvsizlantirildi. Karbonat angidrid bilan kritik nuqtada quritilgandan so'ng, namunalar oltin bilan purkash bilan qoplandi va nihoyat skanerlovchi elektron mikroskop yordamida tekshirildi.15
Nashr vaqti: 2025-yil 15-dekabr