O'simlik va patogenlar
Illinoys universitetida (hozirgi UC Davisda) doktor Pat Braun tomonidan jo'xori konversiyasi populyatsiyasi (SCP) deb nomlanuvchi jo'xori assotsiatsiyasi populyatsiyasini xaritalashtirgan.U ilgari tasvirlangan bo'lib, AQSh muhitida o'simliklarning o'sishi va rivojlanishini osonlashtirish uchun fotoperiodning sezgirligi va kichikroq bo'yiga aylantirilgan turli xil chiziqlar to'plamidir.Ushbu tadqiqotda ushbu populyatsiyadan 510 ta chiziq ishlatilgan, ammo yomon urug'lanish va sifatni nazorat qilishning boshqa muammolari tufayli barcha uchta belgini tahlil qilishda barcha chiziqlar ishlatilmagan.Oxir-oqibat, 345 satrdan olingan ma'lumotlar xitin javobini tahlil qilish uchun, 472 satr flg22 javobi uchun va 456 tasi TLS qarshiligi uchun ishlatilgan.B. cookeiLSLP18 shtammi Arkanzas universitetida doktor Burt Bluhmdan olingan.
MAMP javobini o'lchash
Ushbu tadqiqotda ikki xil MAMP ishlatilgan flg22, (Genscript katalog # RP19986) va chitin .Sorghum o'simliklari issiqxonada tuproq bilan to'ldirilgan (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) yotqizilgan qo'shimchalarda o'stirildi.O'simliklar yig'ish kunida ortiqcha namlikni oldini olish uchun namuna olishdan bir kun oldin sug'orilgan.
Chiziqlar tasodifiy bo'lib, logistik sabablarga ko'ra 60 ta qatorga ekilgan.Har bir chiziq uchun uchta "qozon" har bir chiziqqa ikkita urug' bilan ekilgan.Keyingi partiyalar avvalgi partiya qayta ishlangan zahoti butun populyatsiya baholanmaguncha ekilgan.Ikkala MAMP uchun ikkita eksperimental sinov o'tkazildi, ularning har birida genotiplar qayta tasodifiylashtirildi.
ROS tahlillari yuqorida tavsiflanganidek amalga oshirildi.Qisqacha aytganda, har bir chiziq uchun oltita urug' 3 xil qozonga ekilgan.Olingan ko'chatlardan uchtasi bir xillik asosida tanlangan.G'ayrioddiy ko'rinadigan yoki ko'pchilikdan sezilarli darajada baland yoki qisqaroq bo'lgan ko'chatlar ishlatilmadi.3 mm diametrli to'rt barg disklari uchta turli xil 15 kunlik jo'xori o'simliklarining 4-bargining eng keng qismidan kesilgan.Ikki o'simlikdan bitta bargga bitta disk va bitta o'simlikdan ikkita disk, ikkinchi disk suv nazoratiga aylanadi (pastga qarang).Disklar alohida-alohida 50 µl H20 ga qora 96 quduqli plastinkada suzildi, yorug'lik ta'siridan qochish uchun alyuminiy muhr bilan yopildi va xona haroratida bir kechada saqlanadi.Ertasi kuni ertalab reaksiya eritmasi 2 mg/ml xemiluminesans probi L-012 (Wako, katalog № 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroksidaza (VI-A turi, Sigma-Aldrich, katalog № P6782) va 100 mg/ml Chitin yoki 2 mkM Flg22.Ushbu reaksiya eritmasidan 50 µl to‘rtta quduqning uchtasiga qo‘shildi.To'rtinchi quduq soxta nazorat edi, unga MAMPdan tashqari reaksiya eritmasi qo'shildi.Har bir plastinkada faqat suv bo'lgan to'rtta bo'sh quduq ham kiritilgan.
Reaksiya eritmasi qo'shilgandan so'ng, lyuminesans SynergyTM 2 ko'p aniqlovchi mikroplata o'quvchi (BioTek) yordamida har 2 daqiqada 1 soat davomida o'lchandi.Plastinkani o'qish qurilmasi ushbu 1 soat davomida har 2 daqiqada luminesans o'lchovlarini oladi.Har bir quduq uchun qiymat berish uchun barcha 31 ko'rsatkichlar yig'indisi hisoblab chiqilgan.Har bir genotip uchun MAMP javobining taxminiy qiymati (uchta eksperimental quduqning o'rtacha luminesans qiymati - soxta quduq qiymati) - o'rtacha bo'sh quduq qiymatidan minus sifatida hisoblangan.Bo'sh quduq qiymatlari doimiy ravishda nolga yaqin edi.
Barg disklariNikotiana bentamiana, bitta yuqori sezgir jo'xori liniyasi (SC0003) va bitta past sezgir jo'xori liniyasi (PI 6069) ham sifatni nazorat qilish maqsadida har bir 96 quduqli plastinkada nazorat sifatida kiritilgan.
B. cookeiinokulyatsiya tayyorlash va emlash
B. cookeiinokulum yuqorida aytib o'tilganidek tayyorlangan.Qisqacha aytganda, jo'xori donalari uch kun davomida suvda namlangan, yuvilgan, 1 litrli konusli kolbalarga solingan va bir soat davomida 15psi va 121 ° C da avtoklavlangan.Keyin donalar yangi kulturadan olingan taxminan 5 ml maseratsiyalangan mitseliya bilan emlanganB. cookeiLSLP18 ajratib olinadi va har 3 kunda kolbalarni silkitib, xona haroratida 2 haftaga qoldiriladi.2 hafta o'tgach, qo'ziqorin bilan zararlangan jo'xori donalari havoda quritilgan va keyin dala emlashgacha 4 ° C da saqlanadi.Xuddi shu emlash butun sinov uchun ishlatilgan va har yili yangi qilingan.Emlash uchun 6-10 zararlangan don 4-5 haftalik jo'xori o'simliklari ichiga joylashtirildi.Ushbu qo'ziqorinlardan hosil bo'lgan sporlar bir hafta ichida yosh jo'xori o'simliklarida infektsiyani boshladi.
Urug'larni tayyorlash
Dalaga ekishdan oldin jo'xori urug'i fungitsid, insektitsid va saqlovchi aralashmasi bilan ishlov berilgan, o'z ichiga ~ 1% Spirato 480 FS fungitsidi, 4% Sebring 480 FS fungitsidi, 3% Sorpro 940 ES urug'lik himoyachisi.Keyin urug'lar 3 kun davomida havoda quritilgan, bu urug'lar atrofida bu aralashmaning nozik bir qoplamasini ta'minlagan.Xavfsizlik vositasi Dual Magnum gerbitsidini paydo bo'lishidan oldin davolash sifatida ishlatishga ruxsat berdi.
Maqsadli barg dog'iga qarshilikni baholash
SCP 2017-yil 14-15-iyun kunlari va 2018-yil 20-iyun kunlari Kleyton shahridagi Markaziy ekinlar ilmiy-tadqiqot stantsiyasida har bir holatda ikkita eksperimental takrorlash bilan tasodifiy to'liq blokli dizaynda ekilgan.Tajribalar har bir uchastkaga 10 ta urug'dan foydalangan holda 0,9 m qator kengligida 1,8 m bir qatorda ekilgan.Keng ta'sirlarni oldini olish uchun har bir tajribaning chetiga ikkita chegara qatori ekilgan.Tajribalar 2017-yil 20-iyul va 2018-yil 20-iyul kunlari emlandi, bu vaqtda joʻxori oʻsimliklari 3-oʻsish bosqichida edi. Baholar birdan toʻqqizgacha boʻlgan shkala boʻyicha olindi, bunda kasallik belgilarini koʻrsatmagan oʻsimliklar toʻqqiz ball va toʻliq baholandi. o'lik o'simliklar bitta deb baholandi.Har yili emlashdan ikki hafta o'tgach, 2017 yilda ikkita reyting va 2018 yilda to'rtta o'qish o'tkazildi.sAUDPC (kasallik rivojlanish egri chizig'i ostidagi standartlashtirilgan maydon) yuqorida tavsiflanganidek hisoblab chiqilgan.
Yuborilgan vaqt: 2021 yil 01 aprel