Nature.com saytiga tashrif buyurganingiz uchun tashakkur.Siz foydalanayotgan brauzer versiyasi cheklangan CSS-ni qo'llab-quvvatlaydi.Eng yaxshi natijalarga erishish uchun brauzeringizning yangiroq versiyasidan foydalanishni tavsiya qilamiz (yoki Internet Explorer-da Moslik rejimini o'chirib qo'ying).Ayni paytda, doimiy qo'llab-quvvatlashni ta'minlash uchun biz saytni uslubsiz yoki JavaScriptsiz ko'rsatmoqdamiz.
O'simliklardan olingan insektitsid birikmalarining kombinatsiyasi zararkunandalarga qarshi sinergik yoki antagonistik o'zaro ta'sir ko'rsatishi mumkin.Aedes chivinlari olib keladigan kasalliklarning tez tarqalishi va Aedes chivinlari populyatsiyalarining an'anaviy insektitsidlarga chidamliligini hisobga olgan holda, o'simlik efir moylari asosidagi terpen birikmalarining yigirma sakkizta kombinatsiyasi ishlab chiqilgan va Aedes aegypti lichinkalari va kattalar bosqichlariga qarshi sinovdan o'tkazilgan.Beshta o'simlik efir moyi (EO) dastlab larvitsidal va kattalar uchun foydalanish samaradorligi uchun baholandi va GC-MS natijalari asosida har bir EOda ikkita asosiy birikma aniqlandi.Asosiy aniqlangan birikmalar, ya'ni dialil disulfid, dialil trisulfid, karvon, limonen, eugenol, metil evgenol, evkaliptol, evdesmol va chivin alfa-pinen sotib olindi.Keyinchalik bu birikmalarning ikkilik birikmalari subletal dozalar yordamida tayyorlandi va ularning sinergetik va antagonistik ta'siri sinovdan o'tkazildi va aniqlandi.Eng yaxshi larvitsidal kompozitsiyalar limonenni diallil disulfid bilan aralashtirish yo'li bilan, eng yaxshi kattalarga qarshi kompozitsiyalar esa karvonni limonen bilan aralashtirish orqali olinadi.Tijoriy maqsadlarda ishlatiladigan sintetik larvitsid Temphos va kattalar uchun Malathion preparati alohida va terpenoidlar bilan binar kombinatsiyalarda sinovdan o'tkazildi.Natijalar shuni ko'rsatdiki, temefos va diallil disulfid va malation va evdesmol kombinatsiyasi eng samarali kombinatsiyadir.Ushbu kuchli kombinatsiyalar Aedes aegypti ga qarshi foydalanish uchun potentsialga ega.
O'simlik efir moylari (EO) turli xil bioaktiv birikmalarni o'z ichiga olgan ikkilamchi metabolitlar bo'lib, sintetik pestitsidlarga alternativa sifatida tobora muhim ahamiyat kasb etmoqda.Ular nafaqat ekologik va foydalanuvchilar uchun qulay, balki ular turli xil bioaktiv birikmalar aralashmasidir, bu ham dori-darmonlarga qarshilik ko'rsatish ehtimolini kamaytiradi1.GC-MS texnologiyasidan foydalangan holda, tadqiqotchilar turli xil o'simlik efir moylarining tarkibiy qismlarini o'rganib chiqdilar va 17500 ta aromatik o'simliklardan 3000 dan ortiq birikmalarni aniqladilar2, ularning aksariyati insektitsid xususiyatlari uchun sinovdan o'tkazildi va insektitsid ta'siri borligi xabar qilindi3,4.Ba'zi tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, birikmaning asosiy komponentining toksikligi uning xom etilen oksidi bilan bir xil yoki undan kattaroqdir.Ammo individual birikmalardan foydalanish, kimyoviy insektitsidlarda bo'lgani kabi, qarshilikni rivojlantirish uchun yana joy qoldirishi mumkin5,6.Shu sababli, hozirgi e'tibor insektitsid samaradorligini oshirish va maqsadli zararkunandalar populyatsiyalarida qarshilik ehtimolini kamaytirish uchun etilen oksidi asosidagi birikmalar aralashmalarini tayyorlashga qaratilgan.EOlarda mavjud bo'lgan individual faol birikmalar EO ning umumiy faolligini aks ettiruvchi kombinatsiyalarda sinergik yoki antagonistik ta'sir ko'rsatishi mumkin, bu avvalgi tadqiqotchilar tomonidan olib borilgan tadqiqotlarda yaxshi ta'kidlangan 7,8.Vektorni boshqarish dasturi EO va uning komponentlarini ham o'z ichiga oladi.Culex va Anopheles chivinlarida efir moylarining chivinlarni yo'q qilish faolligi keng o'rganilgan.Bir nechta tadqiqotlar umumiy toksiklikni oshirish va nojo'ya ta'sirlarni kamaytirish uchun turli o'simliklarni tijoratda ishlatiladigan sintetik pestitsidlar bilan birlashtirib, samarali pestitsidlarni ishlab chiqishga harakat qildi9.Ammo Aedes aegypti-ga qarshi bunday birikmalar bo'yicha tadqiqotlar kamdan-kam uchraydi.Tibbiyot fanidagi yutuqlar, dori vositalari va vaktsinalarning rivojlanishi vektor yuqadigan ba'zi kasalliklarga qarshi kurashishga yordam berdi.Ammo Aedes aegypti chivinlari tomonidan yuqadigan virusning turli xil serotiplarining mavjudligi emlash dasturlarini muvaffaqiyatsizlikka olib keldi.Shuning uchun, bunday kasalliklar yuzaga kelganda, vektor nazorati dasturlari kasallikning tarqalishini oldini olishning yagona variantidir.Hozirgi stsenariyda Aedes aegypti bilan kurashish juda muhim, chunki u turli viruslar va ularning serotiplari dang isitmasi, Zika, dang gemorragik isitmasi, sariq isitma va boshqalarni keltirib chiqaruvchi asosiy vektor hisoblanadi. Misrda deyarli barcha vektorli Aedes yuqadigan kasalliklar holatlari har yili ortib bormoqda va butun dunyo bo'ylab ortib bormoqda.Shu sababli, bu kontekstda Aedes aegypti populyatsiyalari uchun ekologik toza va samarali nazorat choralarini ishlab chiqish zarurati mavjud.Bu borada potentsial nomzodlar EO, ularning tarkibiy birikmalari va ularning kombinatsiyalaridir.Shu sababli, ushbu tadqiqot Aedes aegypti ga qarshi insektitsid xususiyatlarga ega (ya'ni, yalpiz, muqaddas rayhon, evkalipt dog'i, Allium oltingugurt va melaleuca) beshta o'simlikning asosiy o'simlik EO birikmalarining samarali sinergik birikmalarini aniqlashga harakat qildi.
Barcha tanlangan EOlar 0,42 dan 163,65 ppm gacha bo'lgan 24 soatlik LC50 bilan Aedes aegypti ga qarshi potentsial larvitsidal faollikni ko'rsatdi.Eng yuqori larvitsidal faollik 24 soatda LC50 qiymati 0,42 ppm bo'lgan yalpiz (Mp) EO uchun qayd etilgan, undan keyin 24 soatda LC50 qiymati 16,19 ppm bo'lgan sarimsoq (As) (1-jadval).
Ocimum Sainttum, Os EO bundan mustasno, barcha boshqa to'rtta skrining EO aniq allergik ta'sir ko'rsatdi, LC50 qiymatlari 24 soatlik ta'sir qilish davrida 23,37 dan 120,16 ppm gacha.Thymophilus striata (Cl) EO 24 soat ichida LC50 qiymati 23,37 ppm bo'lgan kattalarni o'ldirishda eng samarali bo'lgan, keyin esa LC50 qiymati 101,91 ppm bo'lgan evkalipt maculata (Em) (1-jadval).Boshqa tomondan, Os uchun LC50 qiymati hali aniqlanmagan, chunki eng yuqori o'lim darajasi 53% eng yuqori dozada qayd etilgan (qo'shimcha 3-rasm).
Har bir EOdagi ikkita asosiy tarkibiy birikma NIST kutubxonasi ma'lumotlar bazasi natijalari, GC xromatogramma maydoni foizi va MS spektrlari natijalari asosida aniqlangan va tanlangan (2-jadval).EO As uchun aniqlangan asosiy birikmalar diallil disulfid va diallil trisulfid edi;EO Mp uchun asosiy birikmalar karvon va limonen, EO Em uchun aniqlangan asosiy birikmalar evdesmol va evkalipt;EO Os uchun aniqlangan asosiy birikmalar evgenol va metil evgenol edi va EO Cl uchun aniqlangan asosiy birikmalar evgenol va a-pinen edi (1-rasm, qo'shimcha rasmlar 5-8, qo'shimcha jadval 1-5).
Tanlangan efir moylarining asosiy terpenoidlarini massa spektrometriyasi natijalari (A-diallil disulfid; B-diallil trisulfid; C-eugenol; D-metil evgenol; E-limonen; F-aromatik seperon; G-a-pinen; H-sineol. R-eudamol).
Jami to'qqizta birikma (diallil disulfid, dialil trisulfid, evgenol, metil evgenol, karvon, limonen, evkaliptol, evdesmol, a-pinen) EO ning asosiy komponentlari bo'lgan samarali birikmalar sifatida aniqlandi va Aedes aegypti da individual ravishda biotahlil qilindi. bosqichlar..Eudesmol birikmasi 24 soatlik ta'sirdan keyin LC50 qiymati 2,25 ppm bo'lgan eng yuqori larvitsidal faollikka ega edi.Diallyl disulfid va diallil trisulfid birikmalari ham potentsial larvitsidal ta'sirga ega ekanligi aniqlangan, o'rtacha subletal dozalari 10-20 ppm oralig'ida.LC50 qiymati 63,35 ppm, 139,29 ppm bo'lgan evgenol, limonen va evkaliptol birikmalarida o'rtacha larvitsid faolligi yana kuzatildi.va 24 soatdan keyin mos ravishda 181,33 ppm (3-jadval).Biroq, hatto eng yuqori dozalarda ham metil evgenol va karvonning sezilarli larvitsid salohiyati topilmadi, shuning uchun LC50 qiymatlari hisoblanmadi (3-jadval).Sintetik larvitsid Temephos 24 soat davomida Aedes aegypti ga nisbatan o'rtacha 0,43 ppm o'ldiradigan kontsentratsiyaga ega edi (3-jadval, qo'shimcha 6-jadval).
Etti birikma (diallil disulfid, diallil trisulfid, evkaliptol, a-pinen, evdesmol, limonen va karvon) samarali EO ning asosiy birikmalari sifatida aniqlandi va kattalar Misr Aedes chivinlariga qarshi alohida sinovdan o'tkazildi.Probit regression tahliliga ko'ra, Eudesmol LC50 qiymati 1,82 ppm bo'lgan eng yuqori potentsialga ega, keyin 24 soatlik ta'sir qilish vaqtida LC50 qiymati 17,60 ppm bo'lgan evkaliptol topildi.Sinovdan o'tgan qolgan beshta birikma 140,79 dan 737,01 ppm gacha bo'lgan LC50 bilan kattalar uchun o'rtacha darajada zararli edi (3-jadval).Sintetik organofosfor malationi evdesmolga qaraganda kuchliroq va boshqa oltita birikmaga qaraganda yuqori bo'lib, 24 soatlik ta'sir qilish davrida LC50 qiymati 5,44 ppm ni tashkil etdi (3-jadval, qo'shimcha 6-jadval).
1:1 nisbatda LC50 dozalarining ikkilik birikmalarini shakllantirish uchun ettita kuchli qo'rg'oshin birikmalari va organofosfor tamefosati tanlangan.Jami 28 ta ikkilik birikmalar tayyorlandi va Aedes aegypti ga qarshi larvitsid samaradorligi uchun sinovdan o'tkazildi.To'qqizta kombinatsiya sinergik, 14 kombinatsiya antagonistik va beshta kombinatsiya larvitsidal emasligi aniqlandi.Sinergetik birikmalar orasida diallil disulfid va temofolning kombinatsiyasi eng samarali bo'lib, 24 soatdan keyin 100% o'lim kuzatildi (4-jadval).Xuddi shunday, limonenning diallil disulfid va evgenolning timetfos bilan aralashmasi yaxshi potentsialni ko'rsatdi, lichinkalar o'limi 98,3% (5-jadval).Qolgan 4 ta kombinatsiya, ya'ni eudesmol plyus evkaliptol, eudesmol plyus limonen, evkaliptol plyus alfa-pinen, alfa-pinen plyus temefos ham sezilarli larvitsidal samaradorlikni ko'rsatdi, o'lim darajasi 90% dan oshdi.Kutilayotgan o'lim darajasi 60-75% ga yaqin.(4-jadval).Biroq, limonenning a-pinen yoki evkalipt bilan birikmasi antagonistik reaktsiyalarni ko'rsatdi.Xuddi shunday, Temefosning evgenol yoki evkalipt yoki evdesmol yoki diallil trisulfid bilan aralashmalari antagonistik ta'sirga ega ekanligi aniqlandi.Xuddi shunday, dialil disulfid va dialil trisulfidning kombinatsiyasi va bu birikmalardan birining evdesmol yoki evgenol bilan birikmasi ularning larvitsid ta'sirida antagonistikdir.Eudesmolning evgenol yoki a-pinen bilan kombinatsiyasi bilan antagonizm ham qayd etilgan.
Katta yoshdagi kislotali faollik uchun sinovdan o'tgan barcha 28 ta ikkilik aralashmalardan 7 tasi sinergik, 6 tasi ta'sir ko'rsatmagan va 15 tasi antagonistik edi.Evkalipt bilan evdesmol va karvon bilan limonen aralashmalari boshqa sinergik birikmalarga qaraganda samaraliroq ekanligi aniqlandi, 24 soat ichida o'lim darajasi mos ravishda 76% va 100% (5-jadval).Malathionning limonen va diallil trisulfiddan tashqari barcha birikmalar bilan sinergik ta'sir ko'rsatishi kuzatilgan.Boshqa tomondan, diallil disulfid va diallil trisulfid o'rtasida antagonizm va ularning ikkalasining evkalipt, evkaliptol, karvon yoki limonen bilan birikmasi aniqlangan.Xuddi shunday, a-pinenning evdesmol yoki limonen bilan, evkaliptolning karvon yoki limonen bilan va limonenning evdesmol yoki malation bilan birikmalari antagonistik larvitsidal ta'sir ko'rsatdi.Qolgan oltita kombinatsiya uchun kutilgan va kuzatilgan o'lim darajasi o'rtasida sezilarli farq yo'q (5-jadval).
Sinergetik ta'sirlar va subletal dozalarga asoslanib, ularning ko'p sonli Aedes aegypti chivinlariga qarshi larvitsidal toksikligi tanlab olindi va qo'shimcha sinovdan o'tkazildi.Natijalar shuni ko'rsatdiki, evgenol-limonen, dialil disulfid-limonen va dialil disulfid-timefos ikkilik birikmalaridan foydalangan holda kuzatilgan lichinkalar o'limi 100% ni tashkil etdi, kutilgan lichinkalar o'limi esa mos ravishda 76,48%, 72,16% va 63,4% ni tashkil etdi..Limonen va evdesmolning kombinatsiyasi nisbatan kamroq samarali bo'lib, 24 soatlik ta'sir qilish davrida 88% lichinkalar o'limi kuzatildi (6-jadval).Xulosa qilib aytganda, to'rtta tanlangan ikkilik birikmalar keng miqyosda qo'llanilganda Aedes aegypti ga qarshi sinergik larvitsidal ta'sir ko'rsatdi (6-jadval).
Katta yoshli Aedes aegypti populyatsiyasini nazorat qilish uchun kattalar uchun bioassay uchun uchta sinergik kombinatsiya tanlangan.Katta hasharotlar koloniyalarida sinab ko'rish uchun kombinatsiyalarni tanlash uchun biz birinchi navbatda ikkita eng yaxshi sinergik terpen birikmalariga e'tibor qaratdik, ya'ni karvon plyus limonen va evkaliptol va eudesmol.Ikkinchidan, sintetik organofosfat malation va terpenoidlarning kombinatsiyasidan eng yaxshi sinergik kombinatsiya tanlandi.Biz ishonamizki, malation va evdesmol kombinatsiyasi eng yuqori kuzatilgan o'lim darajasi va nomzod ingredientlarning juda past LC50 qiymatlari tufayli katta hasharotlar koloniyalarida sinov uchun eng yaxshi kombinatsiyadir.Malathion a-pinen, diallil disulfid, evkalipt, karvon va evdesmol bilan birgalikda sinergizmni namoyish etadi.Ammo LC50 qiymatlarini ko'rib chiqsak, Eudesmol eng past qiymatga ega (2,25 ppm).Malation, a-pinen, dialil disulfid, evkaliptol va karvonning hisoblangan LC50 qiymatlari 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 va 140,79 ppm ni tashkil etdi.mos ravishda.Ushbu qiymatlar malation va evdesmolning kombinatsiyasi dozalash bo'yicha optimal kombinatsiya ekanligini ko'rsatadi.Natijalar shuni ko'rsatdiki, karvon plyus limonen va evdesmol va malation kombinatsiyasi kutilgan o'lim darajasi 61% dan 65% gacha bo'lgan o'lim bilan solishtirganda 100% kuzatilgan o'limga ega.Boshqa kombinatsiya, eudesmol plyus evkalipt, 24 soatlik ta'sirdan keyin o'lim darajasi 78,66% ni ko'rsatdi, kutilgan o'lim darajasi 60%.Tanlangan uchta kombinatsiyaning barchasi kattalar Aedes aegypti ga qarshi keng miqyosda qo'llanilganda ham sinergik ta'sir ko'rsatdi (6-jadval).
Ushbu tadqiqotda Mp, As, Os, Em va Cl kabi tanlangan o'simlik EO'lari Aedes aegypti lichinkalari va kattalar bosqichlarida istiqbolli halokatli ta'sir ko'rsatdi.Mp EO LC50 qiymati 0,42 ppm bo'lgan eng yuqori larvitsidal faollikka ega edi, undan keyin 24 soatdan keyin LC50 qiymati 50 ppm dan kam bo'lgan As, Os va Em EO'lar.Bu natijalar chivinlar va boshqa dipterli chivinlar10,11,12,13,14 oldingi tadqiqotlariga mos keladi.Cl ning larvitsidal ta'siri boshqa efir moylariga qaraganda pastroq bo'lsa-da, LC50 qiymati 24 soatdan keyin 163,65 ppm ni tashkil qiladi, uning kattalar salohiyati 24 soatdan keyin 23,37 ppm LC50 qiymati bilan eng yuqori hisoblanadi.Mp, As va Em EO'lar, shuningdek, 24 soat ta'sir qilishda 100-120 ppm oralig'ida LC50 qiymatlari bilan yaxshi allertsid potentsialini ko'rsatdi, ammo ularning larvitsidal samaradorligidan nisbatan past edi.Boshqa tomondan, EO Os hatto eng yuqori terapevtik dozada ham ahamiyatsiz allergik ta'sir ko'rsatdi.Shunday qilib, natijalar shuni ko'rsatadiki, etilen oksidining o'simliklar uchun zaharliligi chivinlarning rivojlanish bosqichiga qarab o'zgarishi mumkin15.Bu shuningdek, EO ning hasharotlar tanasiga kirib borish tezligiga, ularning aniq maqsadli fermentlar bilan o'zaro ta'siriga va har bir rivojlanish bosqichida chivinning zararsizlantirish qobiliyatiga bog'liq16.Ko'p sonli tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, asosiy komponent birikmasi etilen oksidining biologik faolligida muhim omil hisoblanadi, chunki u umumiy birikmalarning ko'p qismini tashkil qiladi3,12,17,18.Shuning uchun biz har bir EOda ikkita asosiy birikmani ko'rib chiqdik.GC-MS natijalariga ko'ra diallil disulfid va diallil trisulfid EO As ning asosiy birikmalari sifatida aniqlandi, bu avvalgi hisobotlarga mos keladi19,20,21.Oldingi hisobotlarda mentol uning asosiy birikmalaridan biri ekanligi ko'rsatilgan bo'lsa-da, karvon va limonen yana Mp EO22,23 ning asosiy birikmalari sifatida aniqlandi.Os EO tarkibi profili eugenol va metil evgenolning asosiy birikmalar ekanligini ko'rsatdi, bu avvalgi tadqiqotchilarning topilmalariga o'xshaydi16,24.Evkaliptol va evkaliptol Em bargi yog'ida mavjud bo'lgan asosiy birikmalar sifatida xabar qilingan, bu ba'zi tadqiqotchilarning topilmalariga mos keladi25,26, lekin Olalade va boshq.27 topilmalariga zid.Cineole va a-pinenning ustunligi melaleuca efir moyida kuzatilgan, bu avvalgi tadqiqotlarga o'xshaydi28,29.Turli joylarda bir xil o'simlik turidan olingan efir moylarining tarkibi va kontsentratsiyasida o'simliklarning geografik o'sish sharoitlari, o'rim-yig'im vaqti, rivojlanish bosqichi yoki o'simlik yoshi ta'sir ko'rsatadigan ushbu tadqiqotda ham kuzatilgan.kimyotiplarning ko'rinishi va boshqalar.22,30,31,32.Keyin aniqlangan asosiy birikmalar sotib olindi va ularning larvitsidal ta'siri va kattalar Aedes aegypti chivinlariga ta'siri uchun sinovdan o'tkazildi.Natijalar shuni ko'rsatdiki, diallil disulfidning larvitsidal faolligi xom EO As bilan taqqoslangan.Ammo dialil trisulfidning faolligi EO As dan yuqori.Bu natijalar Kimbaris va boshqalar tomonidan olingan natijalarga o'xshaydi.Culex Filippinda 33.Biroq, bu ikki birikma maqsadli chivinlarga qarshi yaxshi autosid faolligini ko'rsatmadi, bu Plata-Rueda va boshqalar 34 Tenebrio molitor bo'yicha natijalariga mos keladi.Os EO Aedes aegypti lichinka bosqichiga qarshi samarali, lekin kattalar bosqichiga qarshi emas.Asosiy individual birikmalarning larvitsidal faolligi xom Os EO ga qaraganda past ekanligi aniqlandi.Bu boshqa birikmalarning rolini va ularning xom etilen oksididagi o'zaro ta'sirini anglatadi.Metil evgenolning o'zi arzimas faollikka ega, evgenolning o'zi esa o'rtacha larvitsidal faollikka ega.Bu xulosa, bir tomondan,35,36 tasdiqlasa, ikkinchi tomondan, avvalgi tadqiqotchilarning xulosalariga ziddir37,38.Eugenol va metyleugenolning funktsional guruhlaridagi farqlar bir xil maqsadli hasharotlar uchun turli toksikliklarga olib kelishi mumkin39.Limonenning o'rtacha larvitsidal faolligi aniqlandi, karvonning ta'siri esa ahamiyatsiz edi.Xuddi shunday, limonenning kattalar hasharotlar uchun nisbatan past toksikligi va karvonning yuqori toksikligi avvalgi ba'zi tadqiqotlar natijalarini tasdiqlaydi40, lekin boshqalarga ziddir41.Intratsiklik va ekzotsiklik pozitsiyalarda qo'sh aloqalarning mavjudligi ushbu birikmalarning larvitsidlar sifatidagi foydasini oshirishi mumkin3,41, to'yinmagan alfa va beta uglerodli keton bo'lgan karvon esa kattalarda toksiklik uchun yuqori potentsialni namoyon qilishi mumkin42.Biroq, limonen va karvonning individual xususiyatlari umumiy EO Mp dan ancha past (1-jadval, 3-jadval).Sinov qilingan terpenoidlar orasida eudesmol eng katta larvitsidal va kattalar faolligiga ega bo'lib, LC50 qiymati 2,5 ppm dan past bo'lib, uni Aedes chivinlarini nazorat qilish uchun istiqbolli birikmaga aylantirdi.Uning ishlashi butun EO Emdan yaxshiroq, garchi bu Cheng va boshq.40 topilmalari bilan mos kelmasa ham.Eudesmol - bu evkalipt kabi kislorodli monoterpenlarga qaraganda kamroq uchuvchan bo'lgan ikki izopren birligi bo'lgan sesquiterpen va shuning uchun pestitsid sifatida katta salohiyatga ega.Evkaliptolning o'zi katta yoshlilarga qaraganda larvitsidal faollikka ega va oldingi tadqiqotlar natijalari buni qo'llab-quvvatlaydi va rad etadi37,43,44.Faoliyatning o'zi butun EO Cl bilan deyarli taqqoslanadi.Yana bir bisiklik monoterpen, a-pinen, kattalar uchun Aedes aegypti ga larvitsidal ta'sirga qaraganda kamroq ta'sir qiladi, bu to'liq EO Cl ta'siriga qarama-qarshidir.Terpenoidlarning umumiy insektitsid faolligiga ularning lipofilligi, uchuvchanligi, uglerodning shoxlanishi, proyeksiya maydoni, sirt maydoni, funktsional guruhlari va joylashuvi ta'sir qiladi45,46.Ushbu birikmalar hujayralar to'planishini yo'q qilish, nafas olish faoliyatini blokirovka qilish, nerv impulslarini uzatishni to'xtatish va hokazolar orqali harakat qilishi mumkin. Utala48.Sintetik organofosfor malationining kattalar faolligi 5,44 ppm da qayd etilgan.Garchi bu ikki organofosfat Aedes aegypti ning laboratoriya shtammlariga nisbatan ijobiy taʼsir koʻrsatgan boʻlsa-da, dunyoning turli burchaklarida chivinlarning bu birikmalarga chidamliligi qayd etilgan49.Biroq, o'simlik preparatlariga qarshilik rivojlanishi haqida shunga o'xshash xabarlar topilmagan50.Shunday qilib, botanikalar vektor nazorati dasturlarida kimyoviy pestitsidlarga potentsial muqobil sifatida qaraladi.
Lichinka ta'siri kuchli terpenoidlar va terpenoidlardan timetfos bilan tayyorlangan 28 ta binar kombinatsiyada (1: 1) sinovdan o'tkazildi va 9 ta kombinatsiya sinergik, 14 ta antagonistik va 5 ta antagonistik deb topildi.Ta'siri yo'q.Boshqa tomondan, kattalar uchun potentsial bioassayda 7 ta kombinatsiya sinergik, 15 ta kombinatsiya antagonistik va 6 ta kombinatsiya hech qanday ta'sir ko'rsatmasligi aniqlandi.Muayyan kombinatsiyalar sinergik ta'sir ko'rsatishining sababi nomzod birikmalarning bir vaqtning o'zida turli muhim yo'llarda o'zaro ta'siri yoki ma'lum bir biologik yo'lning turli xil asosiy fermentlarining ketma-ket inhibisyoni bilan bog'liq bo'lishi mumkin51.Limonenning diallil disulfid, evkalipt yoki evgenol bilan birikmasi kichik va katta miqyosda qo'llashda sinergik bo'lib chiqdi (6-jadval), evkalipt yoki a-pinen bilan birikmasi esa lichinkalarga antagonistik ta'sir ko'rsatishi aniqlandi.O'rtacha, limonen yaxshi sinerjist bo'lib ko'rinadi, ehtimol, metil guruhlari mavjudligi, shox pardaga yaxshi kirib borishi va boshqa ta'sir mexanizmi52,53.Ilgari limonenning hasharotlar kesikulalariga kirib borishi (kontaktning toksikligi), ovqat hazm qilish tizimiga ta'sir qilishi (antifeedant) yoki nafas olish tizimiga ta'sir qilishi (fumigatsiya faolligi) 54, evgenol kabi fenilpropanoidlar esa metabolik fermentlarga 55 ta'sir qilishi mumkinligi haqida xabar berilgan edi. Shuning uchun turli xil ta'sir mexanizmlariga ega bo'lgan birikmalarning kombinatsiyasi aralashmaning umumiy halokatli ta'sirini oshirishi mumkin.Evkaliptol dialil disulfid, evkalipt yoki a-pinen bilan sinergik ekanligi aniqlandi, ammo boshqa birikmalar bilan boshqa birikmalar larvitsidal bo'lmagan yoki antagonistik edi.Dastlabki tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, evkaliptol atsetilxolinesteraza (AChE), shuningdek, oktaamin va GABA retseptorlari ustidan inhibitiv faollikka ega.Tsiklik monoterpenlar, evkaliptol, evgenol va boshqalar ularning neyrotoksik faolligi bilan bir xil ta'sir mexanizmiga ega bo'lishi mumkinligi sababli 57 o'zaro inhibisyon orqali ularning birgalikdagi ta'sirini kamaytiradi.Xuddi shunday, Temefosning diallil disulfid, a-pinen va limonen bilan birikmasi o'simlik mahsulotlari va sintetik organofosfatlar o'rtasidagi sinergetik ta'sir haqidagi oldingi hisobotlarni qo'llab-quvvatlovchi sinergik ekanligi aniqlandi58.
Eudesmol va evkaliptol birikmasi Aedes aegypti ning lichinka va kattalar bosqichlariga sinergik ta'sir ko'rsatishi aniqlandi, ehtimol ularning turli xil kimyoviy tuzilmalari tufayli turli xil ta'sir usullari.Eudesmol (sesquiterpen) nafas olish tizimiga ta'sir qilishi mumkin 59 va evkaliptol (monoterpen) asetilkolinesteraza 60 ta'sir qilishi mumkin.Ingredientlarning ikki yoki undan ortiq maqsadli joylarga birgalikda ta'siri kombinatsiyaning umumiy halokatli ta'sirini kuchaytirishi mumkin.Voyaga etgan moddalar bioassaylarida malation karvon yoki evkaliptol yoki evkaliptol yoki diallil disulfid yoki a-pinen bilan sinergik ekanligi aniqlandi, bu limonen va di qo'shilishi bilan sinergik ekanligini ko'rsatadi.Allil trisulfid bundan mustasno, terpen birikmalarining butun portfeli uchun yaxshi sinergik allertsid nomzodlari.Thangam va Kathiresan61, shuningdek, malatyonning o'simlik ekstraktlari bilan sinergik ta'sirining o'xshash natijalari haqida xabar berishdi.Bu sinergik javob malation va fitokimyoviy moddalarning hasharotlarni detoksifikatsiya qiluvchi fermentlarga qo'shma toksik ta'siriga bog'liq bo'lishi mumkin.Malation kabi organofosfatlar odatda sitoxrom P450 esterazalar va monooksigenazalarni inhibe qilish orqali harakat qiladi62,63,64.Shu sababli, malationni ushbu ta'sir mexanizmlari va turli xil ta'sir mexanizmlari bilan terpenlarni birlashtirish chivinlarga umumiy o'ldiradigan ta'sirni kuchaytirishi mumkin.
Boshqa tomondan, antagonizm tanlangan birikmalarning har bir birikmaga qaraganda kamroq faolligini ko'rsatadi.Ba'zi kombinatsiyalarda antagonizmning sababi shundaki, bitta birikma so'rilish, tarqalish, metabolizm yoki chiqarib yuborish tezligini o'zgartirib, boshqa birikmaning harakatini o'zgartiradi.Dastlabki tadqiqotchilar buni dori kombinatsiyalarida antagonizmning sababi deb hisoblashgan.Molekulalar Mumkin mexanizm 65. Xuddi shunday, antagonizmning mumkin bo'lgan sabablari o'xshash ta'sir mexanizmlari, bir xil retseptor yoki maqsadli joy uchun tarkibiy birikmalarning raqobati bilan bog'liq bo'lishi mumkin.Ba'zi hollarda maqsadli oqsilning raqobatdosh bo'lmagan inhibisyonu ham paydo bo'lishi mumkin.Ushbu tadqiqotda ikkita organosulfur birikmasi, diallil disulfid va diallil trisulfid, bir xil maqsadli sayt uchun raqobat tufayli, antagonistik ta'sir ko'rsatdi.Xuddi shunday, bu ikki oltingugurt birikmasi antagonistik ta'sir ko'rsatdi va evdesmol va a-pinen bilan birlashganda hech qanday ta'sir ko'rsatmadi.Eudesmol va alfa-pinen tabiatda tsiklik, dialil disulfid va dialil trisulfid esa alifatikdir.Kimyoviy tuzilishga asoslanib, ushbu birikmalarning kombinatsiyasi umumiy o'limga olib keladigan faollikni oshirishi kerak, chunki ularning maqsadli joylari odatda har xil bo'ladi34,47, ammo eksperimental ravishda biz antagonizmni topdik, bu bu birikmalarning ba'zi noma'lum organizmlardagi roli bilan bog'liq bo'lishi mumkin in vivo .o'zaro ta'sir natijasida tizimlar.Shunga o'xshab, sineol va a-pinenning kombinatsiyasi antagonistik javoblarni keltirib chiqardi, garchi tadqiqotchilar ilgari ikkala birikma turli xil ta'sir maqsadlariga ega ekanligini xabar qilishgan47,60.Ikkala birikma ham siklik monoterpenlar bo'lganligi sababli, bog'lanish uchun raqobatlashadigan va o'rganilayotgan kombinatorik juftlarning umumiy toksikligiga ta'sir qiladigan ba'zi umumiy maqsadli joylar bo'lishi mumkin.
LC50 qiymatlari va kuzatilgan o'lim darajasiga asoslanib, ikkita eng yaxshi sinergik terpen kombinatsiyasi, ya'ni karvon + limonen va evkaliptol + evdesmol juftlari, shuningdek, terpenlar bilan sintetik fosfororganik malation tanlandi.Malathion + Eudesmol birikmalarining optimal sinergetik birikmasi kattalar uchun insektitsid bioassayida sinovdan o'tkazildi.Ushbu samarali kombinatsiyalar nisbatan katta ta'sir qilish joylarida ko'p sonli shaxslarga qarshi ishlay oladimi yoki yo'qligini tasdiqlash uchun katta hasharotlar koloniyalarini maqsad qilib oling.Bu kombinatsiyalarning barchasi hasharotlarning katta to'dalariga qarshi sinergik ta'sir ko'rsatadi.Shunga o'xshash natijalar Aedes aegypti lichinkalarining katta populyatsiyalariga qarshi sinovdan o'tkazilgan optimal sinergik larvitsidal kombinatsiya uchun olingan.Shunday qilib, shuni aytish mumkinki, o'simlik EO birikmalarining samarali sinergik larvitsidal va kattalarga qarshi birikmasi mavjud sintetik kimyoviy moddalarga qarshi kuchli nomzod bo'lib, keyinchalik Aedes aegypti populyatsiyalarini nazorat qilish uchun ishlatilishi mumkin.Xuddi shunday, sintetik larvitsidlar yoki kattalarga qarshi vositalarning terpenlar bilan samarali kombinatsiyasi chivinlarga yuboriladigan timetfos yoki malation dozalarini kamaytirish uchun ham ishlatilishi mumkin.Ushbu kuchli sinergik kombinatsiyalar Aedes chivinlarida dori qarshiligining evolyutsiyasi bo'yicha kelajakdagi tadqiqotlar uchun echimlar berishi mumkin.
Aedes aegypti tuxumlari Mintaqaviy tibbiy tadqiqot markazi, Dibrugarh, Hindiston Tibbiy tadqiqotlar kengashidan yig'ilgan va nazorat ostida harorat (28 ± 1 ° C) va namlik (85 ± 5%) ostida, Gauhati universitetining Zoologiya bo'limida saqlanadi. quyidagi shartlar: Arivoli va boshqalar tasvirlangan.Yumurtadan chiqqandan so'ng, lichinkalar lichinkalar bilan oziqlangan (it pechene kukuni va xamirturush 3: 1 nisbatda), kattalar esa 10% glyukoza eritmasi bilan oziqlangan.Voyaga etgan urg'ochi chivinlarning paydo bo'lishining 3-kunidan boshlab albinos kalamushlarning qonini so'rishga ruxsat berildi.Filtr qog'ozini stakandagi suvga botirib, tuxum qo'yadigan katakka soling.
Tanlangan o'simlik namunalari, ya'ni evkalipt barglari (Myrtaceae), muqaddas rayhon (Lamiaceae), yalpiz (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) va allium lampalar (Amaryllidaceae).Guvahatidan to'plangan va Gauhati universitetining botanika bo'limi tomonidan aniqlangan.Yig'ilgan o'simlik namunalari (500 g) 6 soat davomida Clevenger apparati yordamida gidrodistillashdan o'tkazildi.Chiqarilgan EO toza shisha flakonlarda to'plangan va keyingi o'rganish uchun 4 ° C da saqlanadi.
Larvitsidal toksiklik Jahon sog'liqni saqlash tashkilotining biroz o'zgartirilgan standart protseduralari yordamida o'rganildi 67 .Emulsifikator sifatida DMSO dan foydalaning.Har bir EO kontsentratsiyasi dastlab 100 va 1000 ppm da sinovdan o'tkazildi, har bir replikatsiyada 20 ta lichinka paydo bo'ldi.Natijalarga ko'ra, kontsentratsiya diapazoni qo'llanildi va o'lim 1 soatdan 6 soatgacha (1 soatlik interval bilan) va davolanishdan keyin 24 soat, 48 soat va 72 soat ichida qayd etildi.Subletal kontsentratsiyalar (LC50) 24, 48 va 72 soat ta'sir qilishdan keyin aniqlandi.Har bir konsentratsiya uch nusxada, bitta salbiy nazorat (faqat suv) va bitta ijobiy nazorat (DMSO bilan ishlangan suv) bilan tahlil qilindi.Agar qo'g'irchoq paydo bo'lsa va nazorat guruhidagi lichinkalarning 10% dan ko'prog'i nobud bo'lsa, tajriba takrorlanadi.Agar nazorat guruhidagi o'lim darajasi 5-10% gacha bo'lsa, Abbott 68 tuzatish formulasidan foydalaning.
Ramar va boshqalar tomonidan tasvirlangan usul.69 erituvchi sifatida asetondan foydalangan holda Aedes aegypti ga qarshi kattalar uchun bioassay uchun ishlatilgan.Har bir EO dastlab 100 va 1000 ppm konsentratsiyasida kattalar Aedes aegypti chivinlariga qarshi sinovdan o'tkazildi.Har bir tayyorlangan eritmadan 2 ml dan Whatman raqamiga surting.1 dona filtr qog'ozi (o'lchami 12 x 15 sm2) va aseton 10 daqiqa davomida bug'lanadi.Nazorat sifatida faqat 2 ml aseton bilan ishlov berilgan filtr qog'ozi ishlatilgan.Aseton bug'langandan so'ng, ishlov berilgan filtr qog'ozi va nazorat filtr qog'ozi silindrsimon naychaga (chuqurligi 10 sm) joylashtiriladi.O'nta 3-4 kunlik qon bilan oziqlanmaydigan chivinlar har bir konsentratsiyaning uch nusxasiga o'tkazildi.Dastlabki sinovlar natijalariga ko'ra, tanlangan yog'larning turli konsentratsiyasi sinovdan o'tkazildi.O'lim chivin chiqqandan keyin 1 soat, 2 soat, 3 soat, 4 soat, 5 soat, 6 soat, 24 soat, 48 soat va 72 soatdan keyin qayd etilgan.24 soat, 48 soat va 72 soatlik ta'sir qilish vaqtlari uchun LC50 qiymatlarini hisoblang.Agar nazorat uchastkasining o'lim darajasi 20% dan oshsa, butun testni takrorlang.Xuddi shunday, agar nazorat guruhidagi o'lim darajasi 5% dan ortiq bo'lsa, Abbott formulasidan foydalanib, ishlov berilgan namunalar uchun natijalarni moslang68.
Tanlangan efir moylarining tarkibiy birikmalarini tahlil qilish uchun gaz xromatografiyasi (Agilent 7890A) va massa spektrometriyasi (Accu TOF GCv, Jeol) amalga oshirildi.GC FID detektori va kapillyar ustun (HP5-MS) bilan jihozlangan.Tashuvchi gaz geliy edi, oqim tezligi 1 ml/min.GC dasturi Allium sativumni 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M va Ocimum Sainttumni 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, yalpiz uchun 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, evkalipt uchun 20,60-1M-10-200-3M-30-280 va qizil uchun Ming qatlam uchun ular ular 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Har bir EO ning asosiy birikmalari GC xromatogrammasi va massa spektrometriyasi natijalari (NIST 70 standartlari ma'lumotlar bazasiga havola) asosida hisoblangan maydon ulushi asosida aniqlangan.
Har bir EOdagi ikkita asosiy birikma GC-MS natijalari asosida tanlangan va keyingi bioassaylar uchun Sigma-Aldrichdan 98-99% tozalikda sotib olingan.Yuqorida ta'riflanganidek, birikmalar Aedes aegypti ga qarshi larvitsidal va kattalar samaradorligi uchun sinovdan o'tkazildi.Eng ko'p qo'llaniladigan sintetik larvitsidlar tamefosat (Sigma Aldrich) va kattalar uchun malathion (Sigma Aldrich) ularning samaradorligini tanlangan EO birikmalari bilan solishtirish uchun tahlil qilindi.
Tanlangan terpen birikmalari va terpen aralashmalari va tijorat organofosfatlarning (tilefos va malation) ikkilik aralashmalari har bir nomzod birikmaning LC50 dozasini 1: 1 nisbatda aralashtirish orqali tayyorlangan.Tayyorlangan kombinatsiyalar yuqorida aytib o'tilganidek, Aedes aegypti ning lichinka va kattalar bosqichlarida sinovdan o'tkazildi.Har bir bioassay har bir kombinatsiya uchun uch nusxada va har bir kombinatsiyada mavjud bo'lgan alohida birikmalar uchun uch nusxada amalga oshirildi.Maqsadli hasharotlarning o'limi 24 soatdan keyin qayd etilgan.Quyidagi formuladan foydalanib, ikkilik aralashma uchun kutilayotgan o'lim darajasini hisoblang.
Bu erda E = Aedes aegypti chivinlarining ikkilik kombinatsiyaga javoban kutilayotgan o'lim darajasi, ya'ni ulanish (A + B).
Har bir ikkilik aralashmaning ta'siri Pavla52 tomonidan tasvirlangan usul bo'yicha hisoblangan ch2 qiymatiga asoslanib, sinergik, antagonistik yoki ta'sir yo'q deb belgilandi.Quyidagi formuladan foydalanib har bir kombinatsiya uchun ch2 qiymatini hisoblang.
Hisoblangan ch2 qiymati mos keladigan erkinlik darajalari (95% ishonch oralig'i) uchun jadval qiymatidan kattaroq bo'lsa va kuzatilgan o'lim kutilgan o'lim darajasidan oshib ketgan bo'lsa, kombinatsiyaning ta'siri sinergik deb ta'riflandi.Xuddi shunday, agar har qanday kombinatsiya uchun hisoblangan ch2 qiymati ba'zi erkinlik darajasi bilan jadval qiymatidan oshsa, lekin kuzatilgan o'lim kutilgan o'limdan past bo'lsa, davolash antagonistik hisoblanadi.Va agar har qanday kombinatsiyada ch2 ning hisoblangan qiymati mos keladigan erkinlik darajasidagi jadval qiymatidan kam bo'lsa, kombinatsiya hech qanday ta'sir ko'rsatmaydi.
Ko'p sonli hasharotlarga qarshi sinovdan o'tkazish uchun 3-4 potentsial sinergik kombinatsiyalar (100 lichinka va 50 lichinka va kattalar hasharotlar faolligi) tanlangan.Kattalar) yuqoridagidek davom eting.Aralashmalar bilan bir qatorda tanlangan aralashmalarda mavjud bo'lgan alohida birikmalar ham teng miqdordagi Aedes aegypti lichinkalari va kattalar ustida sinovdan o'tkazildi.Kombinatsiya nisbati bitta nomzod birikmaning LC50 dozasining bir qismi va boshqa tarkibiy birikmaning LC50 dozasining bir qismidir.Kattalar faolligi bioassayida tanlangan birikmalar erituvchi asetonda eritildi va 1300 sm3 silindrsimon plastik idishga o'ralgan filtr qog'oziga qo'llandi.Aseton 10 daqiqa davomida bug'lanib, kattalar qo'yib yuborildi.Xuddi shunday, larvitsidal bioassayda LC50 nomzod birikmalarining dozalari avval DMSO ning teng hajmlarida eritildi va keyin 1300 cc plastik idishlarda saqlanadigan 1 litr suv bilan aralashtirildi va lichinkalar qo'yib yuborildi.
LC50 qiymatlarini hisoblash uchun SPSS (versiya 16) va Minitab dasturi yordamida 71 qayd etilgan o'lim ma'lumotlarining ehtimollik tahlili o'tkazildi.
Xabar vaqti: 2024 yil 01 iyul